薄層色譜儀自身的優(yōu)勢,其特點:儀器簡單、操作方便、快速、幾至幾十分鐘完成、靈敏度高、試樣處理簡單、可以給出感性直觀結果(彩色譜圖)、經濟等。
薄層色譜儀薄層的制備:玻璃板規(guī)格,平整光滑;固定相加粘合劑研磨混勻;鋪板:均勻、105活化備用;另外介紹商用薄層板的分類;動畫演示制板過程。點樣:試樣配置1-2%,用揮發(fā)性溶劑;位置:在薄層板底端1.5cm畫一條基線,標出點樣位置間隔1.5cm,據(jù)邊緣2cm,并解釋劃線標點的意義;量:少點樣,輕觸,斑點要小一般小于3mm,少量多次揮干后再點;揮干后再展開動畫演示點樣過程。展開:根據(jù)相似相容原則選展開劑,比例準確量取,混勻后飽和20min左右,展開距離即溶劑前沿距基線的距離控制適當,動畫演示展開過程。
如果沒有飽和可能會出現(xiàn)邊緣效應,解釋邊緣效應的原因:由于展開劑有不同溶劑組成,揮發(fā)性不同,在溶劑上行過程中極性小的溶劑邊緣處易揮發(fā),造成邊緣的極性比中心大,溶劑沿邊緣移動快,造成邊緣效應。解決方法:飽和,展開槽內壁貼濾紙,少點樣、靠中間點樣。檢出:達到一定的展距后,拿出薄層板,先在溶劑前沿畫一條線,記錄前沿距離;光學檢出:本身有顏色;紫外吸收;熒光板在紫外燈下定位斑點;試劑檢出:噴霧、浸漬、蒸汽。定性:薄層色譜通常利用比移值Rf即原點到斑點中心距離比溶劑展開距離。定性鑒別,分別計算對照品的Rf與供試品的Rf值,若一致即為同一物質。
薄層色譜儀是一種非常有用的跟蹤反應的手段,還可以用于柱色譜分離中合適溶劑的選擇。薄層色譜常用的固定相有氧化鋁或硅膠。流動相則是一種極性待選的溶劑。將溶液中的反應混合物點在薄板上,然后利用毛細作用使溶劑(或混合溶劑)沿板向上移動進行展開。根據(jù)混合物中組分的極性,不同化合物將會在薄板上移動不同的距離。極性強的化合物會“粘”在極性的硅膠上,在薄板上移動的距離比較短。而非極性的物質將會在流動的溶劑相中保留較長的時間從而在板上移動較大的距離。